荧光定量PCR检测鼻咽部脱落细胞内EBV-DNA

被引:3
作者
张明
童明庆
潘世扬
黄珮珺
赵旺胜
机构
[1] 南京医科大学第一附属医院临床检验中心
[2] 南京医科大学第一附属医院临床检验中心 南京
[3] 南京
关键词
荧光定量PCR; 细胞内参照; β珠蛋白; EBVDNA; 鼻咽癌;
D O I
10.13602/j.cnki.jcls.2002.02.013
中图分类号
R446.9 [其他];
学科分类号
100208 ;
摘要
目的 建立荧光定量PCR(FQ PCR)检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法。方法 以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本 ,以EB病毒基因序列中EBNA1(核抗原 1)基因片段作为扩增的靶DNA ,同时以人 β 珠蛋白DNA片段作为内参照 ,合成了两对引物 ,并设计了两个特异的荧光探针 ,优化了FQ PCR反应体系 ,同时对这两个片段进行扩增 ,每一标本得到两个Ct值 :CtE和Ctβ ,计算CtE/Ctβ ,得到单位细胞EB病毒的相对量。 结果 临床标本 2 9例中 ,阳性 2 2例 ,阴性 7例 ,临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌 (NPC) ,阴性者全部为非鼻咽癌。结论 建立的FQ PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法 ,能反映单位细胞病毒的复制情况 ,可用于NPC的筛查 ,并可能应用于该病的风险评估和疗效观察
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