用人肝细胞cDNA文库制备Dig-Fas探针

被引:11
作者
唐恩洁
杨宗琪
赵明才
冯莉
任碧轩
敬保迁
李仁
眭维耻
机构
[1] 川北医学院分子生物学研究所!四川南充
关键词
Fas; cDNA文库; Dig标记; 探针;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
为探索SLE发生、发展与Fas表达的关系 ,本文采用降落PCR技术、分子克隆技术和Fas特异性引物 ,将从人肝细胞cDNA文库中扩增的FascDNA插入T -easyvector中 ,转染JM10 9,经耐药性和lacZ插入失活筛选 ,快速细胞裂解法、限制性内切酶酶切片段和PCR扩增试验分析鉴定 ,确证获阳性转化子。然后采用地高辛化学连接标记和查见方法 ,标记扩增、分离和纯化的FascDNA ,经斑点免疫实验证实获高滴度Dig -FascDNA探针
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