NGF和GDNF基因重组逆转录病毒体外感染神经干细胞及其鉴定

被引:4
作者
阮奕文
王传恩
王宁利
谢瑶
姚志彬
机构
[1] 中山医科大学解剖学教研室与脑研究室!广州
[2] 中山医科大学眼科中心!广州
关键词
神经干细胞; 重组逆转录病毒; 基因; 感染; 表达;
D O I
10.16098/j.issn.0529-1356.2001.04.002
中图分类号
R459.9 [其他疗法];
学科分类号
摘要
目的 探讨神经干细胞 (NSC)直接作为基因靶细胞能否被重组逆转录病毒感染以及感染后目的基因的表达。 方法 分别用NGF和GDNF基因重组逆转录病毒上清液感染NSC 2d ;G418筛选后加入bFGF扩增培养 ;取感染后的NSC培养液 (NGF GDNF条件培养液 )培养PC12细胞和中脑腹侧神经元 ;用免疫组织化学染色方法检测中脑腹侧多巴胺神经元的形态改变以及感染后NSC对目的基因的表达。 结果 经G418筛选后 ,约 5 0 %感染NGF和GDNF基因重组逆转录病毒的NSC呈G418抗性 ;这些感染后的NSC开始分化 ,分裂球向四周长出放射状突起 ,部分细胞沿突起向外迁移生长 ;感染NGF基因的NSC呈星形 ,胞体较大 ,突起较粗。感染GDNF基因的NSC呈梭形 ,胞体较小 ,突起较长。经NGF条件培养液培养的PC12细胞 ,数量增多 ,突起明显变长。经GDNF条件培养液培养的中脑多巴胺神经元 (TH阳性细胞 )其胞体亦增大 ,突起伸长。大部分G418抗性的NSC出现NGF和GDNF免疫染色。 结论 神经干细胞可直接作为基因靶细胞 ,能被NGF和GDNF基因重组逆转录病毒有效感染而表达和分泌有生物学活性的NGF和GDNF。
引用
收藏
页码:297 / 300+390 +390
页数:5
相关论文
共 4 条
  • [1] GDNF基因逆转录病毒表达载体的构建与鉴定
    王传恩
    阮奕文
    姚志彬
    谢瑶
    郭辉玉
    [J]. 神经解剖学杂志, 2000, (03) : 209 - 212
  • [2] 体外培养获取高纯度神经前体细胞
    阮奕文
    谢瑶
    王传恩
    姚志彬
    [J]. 解剖学研究, 2000, (01) : 32 - 34+82
  • [3] 人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定
    王传恩
    阮奕文
    姚志彬
    谢瑶
    郭辉玉
    [J]. 中山医科大学学报, 1999, (03) : 167 - 170
  • [4] Neural stem and progenitor cells: a strategy for gene therapy and brain repair .2 Pincus DW,Goodman R,Fraser RAR,et al. Neurosurgery . 1998