目的 :构建 pcDNA3-cbfa1重组质粒 ,瞬时转染人牙乳头细胞 ,观察cbfa1在转染前后的表达。方法 :用EcoRⅤ和XbaⅠ双酶切pcDNA3空载体和 pGEM - 5z -f -cbfa1质粒 ,电泳回收后进行连接 ,连接产物转化DH5α ,进行酶切鉴定和PCR分析。采用脂质体法瞬时转染人牙乳头细胞 ,制备细胞爬片 ,免疫组织化学染色。结果 :共挑出 7个阳性转化子 ,酶切和PCR分析结果均显示重组质粒构建成功。正常人牙乳头细胞中cbfa1表达阴性 ,瞬时转染 2 4h后 ,cbfa1表达阳性。结论 :成功构建了 pcDNA3-cbfa1真核表达载体 ,人牙乳头细胞无cbfa1的表达 ,当转染正义的cbfa1重组质粒后出现cbfa1的表达 ,为进一步研究cbfa1在牙乳头细胞中的作用奠定了基础