猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆及序列分析

猪细小病毒 （Porcineparvovirus,PPV）SY99株由本室分离 ,提取SY99株的基因组DNA ,利用PCR扩增出全长NS1基因 ,将该基因克隆到原核表达载体pET2 8a中并测序。结果表明 ,NS1基因全长 1989bp ,编码 6 6 2个氨基酸。氨基酸序列中含有在PPV复制过程中发挥重要作用的保守基序GKRN ,并有 3个潜在的糖基化位点 ,分别位于 35 6～ 35 9、4 4 6～ 4 4 9、5 13～ 5 16位氨基酸处。SY99株NS1基因与其它PPV毒株NADL21、NADL22、Kresse株核苷酸同源性分别为 98%、99%、99% ,氨基酸同源性分别为 97%、99%、99%。NS1基因的克隆为研究NS1在PPV的复制中所发挥的功能及利用人工表达的NS1来制备诊断抗原提供了可能