一种适于PCR扩增的小麦基因组DNA快速提取法

被引:44
作者
柴建芳
刘旭
贾继增
机构
[1] 中国农业科学院作物科学研究所/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室
关键词
小麦; DNA提取; PCR;
D O I
10.13430/j.cnki.jpgr.2006.02.023
中图分类号
S512.1 [小麦];
学科分类号
摘要
许多小麦分子生物学研究需要对大量的小麦样品进行PCR检测,因此,建立一种快速提取小麦基因组DNA的方法十分必要。根据国外报道的一种快速提取水稻和玉米基因组DNA的方法,我们对部分提取步骤进行变动后,在小麦上进行了尝试,长度为1.5kb的片段能得到稳定的扩增。该方法样品研磨在1.5ml的离心管内进行,后续操作不用酚、氯仿、CTAB、SDS和巯基乙醇,整个提取过程不需要使用通风橱,操作步骤简单,花费时间少,而且提取的小麦基因组DNA完整性好,量也较可观。一个DNA样品可供50~100次PCR反应使用,适用于小麦遗传多样性、分子标记辅助选择、转基因后代检测以及引物筛选、分子标记定位等多种研究。
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Wilson, R ;
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MOLECULAR BREEDING, 1998, 4 (05) :427-433