高效液相色谱分析氧化型低密度脂蛋白处理的U937细胞胞内胆固醇及胆固醇酯

为找到一种判断泡沫细胞与非泡沫细胞的简便而较为实用的方法，本文采用正己烷-异丙醇从U937单核细胞内提取胆固醇，并用醇溶性氢氧化钾除去其中的甘油三酯成分，用三氯乙酸去其中的蛋白成分。以异丙醇：正己烷：乙腈为溶剂洗脱系统，采用疏水性较弱的核酸分离柱，进行高效液相色谱分析，分离纯化胆固醇和胆固醇酯成分，并采用L－B（LiebermanBurchard）显色法结合波谱分析法对所胆固醇峰进行鉴定。结果表明胆固醇含量在0．05～1g／L之间与其峰面积有较好的线性关系，其最低检出量为4mg／g细胞蛋白（100mg细胞蛋白相当于1×108个细胞），通过定性与定量分析，结果表明，U937单核细胞株经氧化型低密度脂蛋白处理48h后，其胞内的胆固醇酯占胞内总胆固醇60％以上。