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RAPD影响因素的研究及实验条件的优化进
被引：39
作者：
夏铭
栾非时
李景鹏
机构：
[1] 东北农业大学
来源：
关键词：
随机扩增多态DNA；影响因素；实验条件；优化;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q5-33 [生物化学实验];
学科分类号：
摘要：
针叶树种红松（Ｐｉｎｕｓｋｏｒａｉｅｎｓｉｓ）和阔叶树种蒙古栎（Ｑｕｅｒｃｕｓｍｏｎｇｏｌｉｃａ）为材料，研究了随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）的影响因素，优化了各种实验条件。ＲＡＰＤ对模板浓度的适应范围比较广，从１０～８０ｎｇ／反应均可得到一致的结果；ｄＮＴＰ的适宜浓度为１５０～３００ｍｍｏｌ／Ｌ；ＴａｑＤＮＡ聚合酶的用量以１～２Ｕ为佳。对于十个碱基的随机引物，合适的复性温度为３５～３７℃；１ｍｉｎ的延伸时间足以满足２ｋｂ以下的ＤＮＡ片段的合成；热循环的次数以４０次为宜。按照优化的ＲＡＰＤ条件进行的重复实验，重现性良好
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页数：7
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