鲤鱼主要变应原的分离、鉴定与纯化

目的对常见的食物过敏原鲤鱼进行特异性抗原成分的分离、鉴定和纯化,为临床诊断及治疗鲤鱼过敏症提供理论依据。方法通过磷酸盐缓冲溶液进行提取、用十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离出多种蛋白组分并测定其分子量;采用蛋白印迹技术(Western-blotting)鉴定其变应原并通过DE52离子交换层析对鲤鱼变应原进行初步纯化,进一步经凝胶过滤层析对变应原混合组分进行纯化。结果SDS-PAGE分离出14种蛋白组分,其中主带有9条,分子量分别为5,46,36,34,26,25,23,20,16 kDa。Western-blitting结果显示,鲤鱼的主要变应原及次要变应原的分子量是42,36 kDa的变应原组分。结论鲤鱼主要特异性变应原为42和36 kDa的蛋白质,为临床诊断和治疗鱼类过敏性疾病提供标准化的应原奠定了基础。