腺伴随病毒载体介导Kringle5基因治疗早产儿视网膜病变大鼠视网膜新生血管

被引：4

作者：

宋哲

黎晓新

机构：

[1] 北京大学人民医院眼科中心

来源：

中华眼底病杂志 | 2005年 / 05期

关键词：

视网膜病,早产儿/治疗; 病毒载量; 凝血致活酶; 生长抑素; 基因疗法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R774.1 [视网膜疾病];

学科分类号：

摘要：

目的观察腺伴随病毒载体介导血管抑素Kringle5基因对SD大鼠早产儿视网膜病变(ROP)模型视网膜新生血管的影响,探寻治疗ROP的新方法。方法亚克隆构建pSNAV-Kringle5-gfp载体,腺伴随病毒包装形成rAAV-Kringle5-gfp。21只鼠高氧环境下建立ROP模型,随机分为实验组和对照组(各21只眼)。两组各取18只眼作视网膜组织切片;各剩3只眼作聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblotting检测。另设正常对照5只大鼠。实验组每只眼注入滴度为2.5×1012vg/ml的rAAV-Kringle5-gfp10μl,对照组每只眼注入滴度为2.5×1011vg/ml的rAAVLacZ10μl。荧光显微镜下观察目的基因在眼组织中的表达。12周后,麻醉下处死大鼠,行血管内皮细胞因子相关抗原染色、血管内皮细胞细胞核记数。结果pSNAV-Kringle5-gfp载体经测序正确;腺伴随病毒载体介导血管抑素Kringle5在玻璃体腔及视网膜有大量表达;目的基因在mRNA水平及蛋白水平均有表达;实验组、阴性对照组视网膜表面内皮细胞细胞核分别为(19.9542±3.8257)、(7.3352±2.7313)个,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论腺伴随病毒载体介导血管抑素Kringle5对ROP视网膜新生血管具有抑制作用。

引用

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共 3 条

[1]

精编分子生物学实验指南.[M].(美)F.奥斯伯(FrederickM.Ausubel)等著;颜子颖;王海林译;.科学出版社.1998,

[2] Intravitreal injection of plasminogen kringle 5, an endogenous angiogenic inhibitor, arrests retinal neovascularization in rats [J].