抑制高迁移率族蛋白1减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后的损伤

被引：5

作者：

宋君来 ^{[1
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李满 ^{[2
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孙麟 ^{[1
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马迅 ^{[1
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吕聪 ^{[1
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贺亚军 ^{[1
]}

机构：

[1] 山西医科大学附属大医院骨科

[2] 山西医科大学第二医院神经内科

来源：

中国组织工程研究 | 2018年 / 22卷 / 28期

关键词：

脊髓损伤; 高迁移率族蛋白质类; 组织工程; 星形胶质细胞; HMGB1; 细胞损伤; 氧糖剥夺/复氧; 干扰; 丙酮酸乙酯; MTT; LDH;

D O I：

暂无

中图分类号：

R651.2 [脊髓];

学科分类号：

100223 [神经外科学];

摘要：

背景:既往对于抑制大鼠体内高迁移率族蛋白1(high mobility group protein,HMGB1)的释放改善脊髓功能的恢复较多,但对于体外培养脊髓星形胶质细胞,抑制HMGB1改善细胞氧糖剥夺/复氧的损伤研究尚少。目的:探讨抑制大鼠脊髓星形胶质细胞HMGB1后减轻细胞氧糖剥夺/复氧的损伤作用。方法:星形胶质细胞从新生SD大鼠脊髓提取,分离,培养鉴定。实验分两部分:第一部分实验,体外培养大鼠脊髓原代星形胶质细胞,对细胞行氧糖剥夺/复氧处理,实验分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧6,12,24 h组。第二部分实验,星形胶质细胞分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧24 h组;特异性RNA干扰组;非特异性RNA干扰组;丙酮酸乙酯组。利用Western blot和ELISA法检测各部分实验各组星形胶质细胞HMGB1的表达和释放量,利用乳酸脱氢酶的漏出率和MTT法检测细胞的损伤和存活率,光镜下观察细胞损伤后细胞形态结构的变化。结果与结论:(1)脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后,HMGB1蛋白表达及分泌升高(P<0.01),且复氧至24 h时达到最高值(P<0.01);特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组HMGB1的表达量明显降低,提示特异的HMGB1shRNA和丙酮酸乙酯能有效抑制HMGB1表达;(2)细胞氧糖剥夺/复氧后,乳酸脱氢酶漏出率均明显增加,细胞存活率降低(P<0.01),复氧至24 h时损伤最为严重(P<0.01)。与氧糖剥夺6 h/复氧24 h组相比,特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组细胞的乳酸脱氢酶漏出率明显下降;(3)光镜下观察细胞在氧糖剥夺/复氧后,细胞出现肿胀,分解等损伤变化,而特异RNA干扰和丙酮酸乙酯组细胞损伤明显减轻;(4)结果提示,HMGB1在脊髓星形胶质细胞损伤发生与发展中起到关键性的作用,且抑制HMGB1后能减轻氧糖剥夺/复氧对大鼠脊髓星形胶质细胞的损伤作用。

引用

页码：4537 / 4543

页数：7

共 15 条

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