梅毒螺旋体荧光定量PCR检测方法的建立和初步临床应用

被引：10

作者：

徐瑾

张顺

机构：

[1] 浙江省宁波市第二医院检验科

来源：

江西医学检验 | 2005年 / 06期

关键词：

梅毒螺旋体; 荧光定量PCR; MGB-Taqman探针;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的建立一种利用MGB-Taqman探针的快速、灵敏、特异、准确定量检测梅毒螺旋体的方法。方法选择梅毒螺旋体的基因组的保守区域,设计合成引物和MGB-Taqman探针,构建质粒标准品pMD18-T-TP,优化定量PCR反应体系,并进行方法学评价。结果1)成功构建了重组质粒pMD18-T-TP。2)建立了利用MGB-Taqman探针的荧光定量PCR方法,其线性范围:101～1010copies/μl;灵敏度:10copies/μl;重复性:批内CV为2.02%,批间CV为2.83%,日间CV为4.23%;特异性:100%。3)初步临床应用证明:该方法比血清学检测方法灵敏度更高,假阳性率低。结论利用MGB-Taqman探针定量检测梅毒螺旋体的方法灵敏度高,特异性高,操作简便,适合临床检验诊断的要求。

引用

页码：529 / 532

页数：4

共 6 条

[1] PCR技术在诊断一期梅毒中的应用 [J].

刘冰 ;

陈华根 ;

杨道琼 .

检验医学与临床, 2004, (02) :49-50+52

[2] 梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展 [J].

马聪 ;

王芳 ;

徐武夷 .

中华医院感染学杂志, 2002, (12) :81-83

[3]

实用传染病学[M]. 人民卫生出版社 , 李梦东主编, 1998

[4]

Surveyand summaryreal-time PCR in virology. MackayIM,Arden KE,Nitsche A. Nucleic Acids Research . 2002

[5]

Detection and quantification of oral treponemes in subgingival plaque by real-time PCR. Asai Y,Jinno T,Igarashi H,et al. Journal of Clinical Microbiology . 2002

[6]

Newtests for syphilis:rational design of a PCR method for detection of treponema pallidumin clinical speci-mens using unique regions of the DNA polymerase I gene. Liu H,Rodes B,Chen CY,et al. Journal of Clinical Microbiology . 2001

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