手性荧光衍生化反相高效液相法分离DL-异丙肾上腺素

目的探讨R（-）-4-（N,N-Dimethylaminosulfonyl）-7-（3-isothiocyanatopyrrolidino）-2,1,3-benzoxadiazole（DBD-PyNCS）为手性荧光衍生化试剂,建立DL-异丙肾上腺素对映体的柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）高灵敏分离及分析的最佳方法。方法分别取DBD-PyNCS乙腈溶液（36mmol/L）、异丙肾上腺素对映体水溶液（1mmol/L）、20%吡啶乙腈溶液各10μL混合于聚丙烯管中,用涡旋搅拌器搅拌1min,在金属恒温仪遮光65℃条件下,反应35min。取衍生产物10μL进样于HPLC中。结果生成的非对映体衍生物（λex=460nm,λem=550nm）在流动相为乙腈-水（35∶65,v/v）,流速为1.0mL/min,在Diamon-silTMC18（150mmx4.6mm,i.d.,5μm）色谱柱上分离成两个完全独立的峰,D-异丙肾上腺素、L-异丙肾上腺素的保留时间分别为26min、31min。异丙肾上腺素对映体在3.23×10-4mol/L2.63×10-3mol/L范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9997）,峰面积测定结果的相对标准偏差为1.83%（n=7）,最低检测限为2.1×10-11mol/L（S/N=3）。结论利用柱前衍生反相高效液相色谱法可以使DL-异丙肾上腺素对映体得到快速、高效的分离。