太湖流域土壤微生物基因组总DNA分离纯化及其质粒文库的初步构建

被引：7

作者：

饶志明

赵有玺

李辉

王正祥

沈微

方惠英

诸葛健

机构：

[1] 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室

[2] 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡

[3] 江苏无锡

来源：

应用与环境生物学报 | 2004年 / 06期

关键词：

太湖流域; 土壤微生物; DNA分离纯化; 质粒文库;

D O I：

暂无

中图分类号：

S154.3 [土壤微生物学];

学科分类号：

071012 ; 0713 ;

摘要：

采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法 ,直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA .所得粗DNA用透析袋法以及NucleaotrapsuspensionDNA纯化试剂盒进行了纯化 .纯化过的DNA能够满足常用限制性内切酶酶切、细菌 16SrDNA通用引物和随机引物进行PCR扩增的要求 .将所得纯品DNA经过EcoRI部分酶切之后与酶切并脱磷酸的pSK-空载体连接 ,再以大肠杆菌JM10 9为宿主细胞初步构建了土壤微生物基因组文库 .图 6参 7

引用

页码：774 / 777

页数：4