采用ARDRA研究双孢蘑菇培养料后发酵过程中的细菌群落结构(Ⅰ)——细菌16S rDNA全长文库的建立

被引：4

作者：

何丽鸿 ^{[1
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]}

于荣利 ^{[1
]}

陈明杰 ^{[1
]}

潘迎捷 ^{[3
]}

机构：

[1] 中华人民共和国农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室,上海市食用菌工程技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海市农业科学院食用菌研究所

[2] 南京农业大学生命科学院微生物系

[3] 上海海洋大学

来源：

食用菌学报 | 2008年 / 15卷 / 04期

关键词：

双孢蘑菇; 培养料后发酵; 细菌16S rDNA文库;

D O I：

10.16488/j.cnki.1005-9873.2008.04.007

中图分类号：

S646.1 [褶伞菌];

学科分类号：

090202 ;

摘要：

采用化学裂解和酶解相结合的方法,以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系,用PEG- 8000进行DNA沉淀.从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA,再以总DNA为模板,以专用引物F27和R1498进行PCR扩增,获得16S rDNA片段,经纯化后构建4个时期样品的细菌16S rDNA文库。试验结果表明,本试验获得的总DNA质量较好。采用PCR扩增可获得多个细菌、放线菌和真菌特异片段;细菌16S rDNA文库的目的片段插入效率在90%以上。

引用

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