发根农杆菌诱导人参产生发根及离体发根中人参皂甙含量的测定

发根农杆菌A4菌株诱导人参 (PanaxginsengC .A .Meyer)产生发根 ,诱导率 31 .6%。转化发根可在无任何激素的MS培养基上快速生长 ,且具有分枝性强、丛生、无向地性等特点。通过对液体培养条件的选择 ,发现人参发根在 1 /2MS液体培养基上 ( 2 5℃、1 1 0r/min摇床上暗培养 )获得最大生长速率 ,经 1 4d培养 ,人参发根鲜重增加了 7.97倍。利用高效液相色谱法测定发根中人参皂甙含量发现 ,发根系R992 3中人参单体皂甙Rb1 含量达到 1 0 .38mg/g ,超过栽培六年生人参根中Rb1 含量 ( 6.45mg/g)。用高压纸电泳方法在人参发根中检测到农杆碱及甘露碱的存在。Southern点杂交证明 :本研究获得的人参发根确已被A4菌株Ri质粒的T -DNA所转化 ,并被整合到人参发根DNA上。