先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA的研究

目的　研究先天性人巨细胞病毒 (HCMV)感染致脑损害后钙调素 (CaM)基因mRNA的改变 ,探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制。方法　选用 10周龄Balb c小鼠 32只 ,雌雄配对合笼 ,合笼前雌雄鼠腹腔内均注射HCMV ,分为 1.0 0ml、0 .5 0ml和 0 .2 5ml各 4笼 ,同时设 4笼作为正常对照组 (腹腔内注射 1.0mlRPMI 16 40培养液 )。剖腹取 2 1d胎鼠大脑皮质 ,分别用逆转录聚合酶链反应技术检测CaMmRNA的相对含量 ,用原位杂交方法检测大脑皮质细胞内相应mRNA及其定位。结果　DNA浓度测定结果表明 ,1.0 0ml组与 0 .5 0ml组胎鼠逆转录聚合酶链反应产物相对浓度明显高于 0 .2 5ml组及对照组 ,前两组比较亦有明显差异。凝胶电泳结果显示 ,对照组与 0 .2 5ml组胎鼠未见阳性条带 ,而 1.0 0ml组胎鼠特异性条带信号强于 0 .5 0ml胎鼠组 ,仅略低于同组母鼠。原位杂交结果显示 ,CaMmRNA不但出现在 1.0 0ml组胎鼠大脑皮质大神经元胞核及胞质内 ,在中、小神经元及胶质细胞的胞核及胞质亦有高密度表达 ,阳性细胞的突起中亦有弱信号存在。结论　先天性HCMV感染胎鼠大脑皮质内CaMmRNA表达量明显增加 ,神经元及胶质细胞均有表达 ,并与感染的病毒剂量有关。