肠炎沙门氏菌种特异性FQ-PCR快速检测方法的建立

被引:3
作者
邓树轩 [1 ]
程安春 [1 ,2 ]
汪铭书 [1 ,2 ]
曹平 [1 ]
尹念春 [1 ]
曹省艳 [1 ]
张振华 [1 ]
颜彬 [1 ]
机构
[1] 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心
[2] 动物疫病与人类健康四川省重点实验室
关键词
肠炎沙门氏菌(SE); 荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR); 种特异性;
D O I
暂无
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
摘要
根据肠炎沙门氏菌(SE)种特异性 DNA 序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp 片段的引物和 TaqMan 探针,首次建立了 SE 的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法。该法在 SE DNA 含量为9×10~8~9×10~4拷贝有较好的线性关系;检测 SE DNA 模板的灵敏度为4拷贝/μL,检测 SE 细菌数的灵敏度为6 CFU/mL;特异性试验表明只对 SE 基因组呈阳性反应。分别应用该技术和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便,结果显示两种方法对心、肝、直肠粪便的阳性检测结果符合率为100%,而 FQ-PCR 对脑的阳性检测率极显著(P<0.01)高于细菌分离。研究结果表明,该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测,可用于 SE分离鉴定、SE 感染疑似病例检测、SE 体内动态分布规律研究及其分子流行病学调查。
引用
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页数:6
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共 3 条
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