抗Der p 2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定

被引:2
作者
张红绪 [1 ]
胡萍 [1 ]
胡庚熙 [2 ]
刘丹丹 [1 ]
邢文会 [1 ]
机构
[1] 河南师范大学生命科学学院
[2] 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
关键词
Der p 2; 单克隆抗体; 杂交瘤; 细胞融合;
D O I
10.16366/j.cnki.1000-2367.2008.04.046
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.采用间接ELISA法、Western blot法确定单克隆抗体的免疫球蛋白的类型和亚类、相对亲和力、特异性,对单克隆抗体进行鉴定.结果:获得3株能稳定分泌高效价Der p 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,1B6为IgG1类,1G11、4B1为IgG2a类.间接ELISA法检测细胞上清效价为104~105,腹水效价为105~106.Westernblot试验证明3株单抗与Der p 2蛋白均有特异性反应.结论:成功制备了3株抗Der p 2的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立Der p 2蛋白检测和纯化的方法奠定了基础.
引用
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共 4 条
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