核因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓破骨细胞形成的实验研究

目的　探讨核因子 κB受体活化因子配体 (RANKL)对成年大鼠破骨细胞生成的影响。方法　培养依赖于巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)的大鼠骨髓巨噬细胞作为前体破骨细胞 ,观察在含RANKL和 /或M CSF的 1 5 %胎牛血清培养基中破骨细胞的生成情况。在盖玻片和牛股骨皮质片上培养 1、3、5和 7d后 ,利用形态学观察、TRAP染色以及骨吸收陷窝检测对破骨细胞的生成进行鉴定 ,并对生成的TRAP(+)细胞进行计数和统计分析。结果　当培养细胞在RANKL和M CSF联合作用下 ,TRAP阳性染色的单核和多核破骨细胞可在 3d内迅速形成 ,骨片吸收实验显示在第 5天时骨片上出现明显的骨吸收征象 ;RAN KL呈剂量依赖型诱导TRAP阳性细胞生成。结论　在M CSF的协同作用下 ,RANKL可明显诱导成年大鼠骨髓破骨细胞的生成。