血脑屏障体外实验模型的建立

被引:18
作者
谢英
叶丽亚
张小滨
侯新朴
娄晋宁
机构
[1] 北京大学药学院药剂学系,卫生部中日友好医院临床研究所病理生理研究室,北京大学药学院药剂学系,北京大学药学院药剂学系,卫生部中日友好医院临床研究所病理生理研究室北京,北京,北京
关键词
血脑屏障; 模型,生物学; 中枢神经系统药物; 电阻; 渗透性;
D O I
10.19723/j.issn.1671-167x.2004.04.029
中图分类号
R-332 [医用实验动物学];
学科分类号
1001 ;
摘要
目的 :应用培养的CBA/J小鼠脑血管内皮细胞 (brainmicrovascularendothelialcells,BMVEC)构建血脑屏障(blood brainbarrier,BBB)的体外实验模型。方法 :将BMVEC种植在明胶包被的 2 4孔板细胞插入器的微孔滤膜上培养至汇合状态 ,通过 4h液面渗漏实验、扫描和透射电镜、血脑屏障形成前后膜两侧的电阻以及辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase ,HRP)的通透性和RMP 7对血脑屏障通透性的调控作用来证实BBB的形成。结果 :BMVEC培养至汇合后 ,4h液面渗漏实验成为阳性 ;扫描电镜显示细胞形成单层 ,透射电镜证实细胞间形成紧密连接 ;跨细胞电阻 (thetransendothelialelectricalresistance ,TEER)分别为汇合前和人脐静脉内皮细胞的 3.2倍和 7.7倍 ;对HRP的通透率分别为前对照组的 1 3.4 %和 6 .7% ;RMP 7处理使HRP在BBB的通透率增加了 2 .7倍。结论 :构建的BBB体外模型在形态学、电阻和通透性方面具备了BBB的基本特性 ,适用于中枢神经系统药物跨BBB能力的研究
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Pharmaceutical Research, 2000, 17 :1212-1219