鹰嘴豆β-半乳糖苷酶的分离纯化与表征

被引:6
作者
李绪渊
赵克浩
孟延发
涂伟霞
机构
[1] 兰州大学化学系!兰州,兰州大学化学系!兰州,中国科学院生物物理研究所,兰州大学生物系!兰州,兰州大学化学系!兰州
关键词
β-半乳糖苷酶; 鹰嘴豆; 分离纯化; 表征; 酶催化作用;
D O I
暂无
中图分类号
O629 [天然化合物];
学科分类号
070303 [有机化学];
摘要
从鹰嘴豆中分离得到了三种β-半乳糖苷酶(酶Ⅰ、酶Ⅱ和酶Ⅲ)。将酶Ⅰ和酶Ⅱ进一步纯化,其比活力分别提高了19倍和48倍.酶活力回收率分别为16%和18%,测得它们的表观分子里分别为2.4×104和5.8×104;最适pH分别5.9和5.0,最适温度分别为55℃和45℃.酶Ⅰ水解ONPG和PNPG的KM分别为33×10-2mol·dm-3和60×10-3mol·dm-3;酶Ⅱ水解ONPG和PNPG的KM分别为30×10-3mol·dm-3和60×10-4mol·dm-3.乳糖和半乳糖为该酶的竞争性可逆抑制剂,棉子糖为非竞争性可逆抑制剂.该酶受Hg2+和PCMB强烈抑制和NEM明显抑制,而Mg2+、Zn2+和Ca2+具有激活作用,推知巯基(-SH)是酶活性中心必须基团.
引用
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页码:629 / 634
页数:6
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