昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达

被引:15
作者
黄亚东
曾锦绣
温硕洋
王艳
李校坤
钟仰进
曹阳
机构
[1] 暨南大学医药生物技术研究开发中心,华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室,华南农业大学资源环境学院昆虫生态研究室,华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室,暨南大学医药生物技术研究开发中心,华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室,华南农业大学蚕学分子生物学与生物技术实验室广州,广州
基金
高等学校骨干教师资助计划; 广东省自然科学基金;
关键词
Cecropin AD基因; Thanatin基因; 融合基因; 表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。
引用
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共 2 条
[1]
昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达 [J].
黄亚东 ;
王艳 ;
温硕洋 ;
曾锦绣 ;
曹阳 ;
李校坤 ;
钟仰进 .
蚕业科学, 2002, (02) :104-108
[2]
抗菌肽AD基因的合成附视频 [J].
郑青 ;
鲍时翔 ;
姚汝华 ;
苏智慧 ;
黄自然 ;
郑学勤 ;
王宇光 .
生物化学与生物物理进展, 1998, (02)