非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立

被引:17
作者
曾少灵 [1 ]
花群义 [1 ]
杨俊兴 [1 ]
张彩虹 [1 ]
孙洁 [1 ]
阮周曦 [1 ]
吕建强 [1 ]
曹琛福 [1 ]
秦智锋 [1 ]
陈兵 [1 ]
陈书琨 [1 ]
杨云庆 [2 ]
机构
[1] 深圳出入境检验检疫局动植中心
[2] 云南出入境检验检疫局技术中心
关键词
非洲猪瘟病毒; 实时荧光PCR; 检测;
D O I
10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.09.004
中图分类号
S852.651 [];
学科分类号
摘要
依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%~1.14%,批间CV值为1.37%~3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。
引用
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页数:6
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