体外培养胚胎神经干细胞的增殖及中药有效成分对其增殖能力的影响

[目的]探讨中药有效成分对神经干细胞(NSCs)增值能力的影响并探讨其作用机制。[方法]从16天SD大鼠胚胎脑体外培养原代NSCs,增生并传代。用Nestin免疫细胞—化学染色(ICC)鉴定NSCs,用BrdU染色鉴定NSCs增生。限量稀释法观察了几种中药有效成分对NSCs增生的作用,如人参皂苷Rg1和黄芪皂苷(ASIV)。[结果]不同剂量的人参皂苷Rg1和黄芪皂苷ASIV能促进神经干细胞的体外增殖。与对照组比较,Rg1和AS的3种剂量可使神经球生成数目增加(P<0.05或P<0.01)。其中两种药物成分低剂量组比其他组效果更显著。Hes1,Hes5和细胞周期蛋白D1的实时定量逆转录—聚合酶链(RT-PCR)分析显示Rg1高剂量组的Hes1基因表达和AS高剂量组Hes5基因表达增长明显。同时,Rg1中剂量组的Hes5基因表达轻微增加(P>0.05)。两药各剂量组的周期蛋白D1(CyclinD1)基因表达可见有增加,但无统计学意义(P>0.05)。[结论]Rg1和ASIV可明显促进神经干细胞体外增殖,实时定量检测结果显示Hes1、Hes5和周期蛋白D1与Rg1和AS促进神经干细胞增殖有一定关系。