水貂阿留申病毒部分VP2基因的克隆表达和重组蛋白的免疫学分析

被引：5

作者：

孟庆峰 ^{[1
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]}

梁艳婷 ^{[2
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肖成蕊 ^{[1
]}

宋战昀 ^{[1
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钱爱东 ^{[2
]}

王伟利 ^{[1
]}

机构：

[1] 吉林出入境检验检疫局

[2] 吉林农业大学动物科学技术学院

来源：

吉林农业大学学报 | 2009年 / 31卷 / 03期

关键词：

水貂阿留申病毒; VP2基因; 克隆表达; 重组蛋白;

D O I：

10.13327/j.jjlau.2009.03.007

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物,利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段,将其克隆到原核表达载体pET-28a中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中,构建了原核表达载体pET-28a-VP2。阳性重组质粒转化宿主菌BL21,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和免疫印迹分析。结果表明蛋白获得了表达,表达产物的分子质量为21 kD,与理论推测的分子质量一致;在终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导下,5 h时表达量达到高峰;Western blot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别,具有相应的抗原性。

引用

页码：330 / 333

页数：4

共 6 条

[1] 水貂阿留申病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达 [J].