柚皮苷对体外培养骨髓间充质干细胞Runx-2和Osterix表达及骨质疏松模型大鼠骨强度的影响

目的:探讨柚皮苷对体外培养骨髓间充质干细胞Runx-2和Osterix表达及骨质疏松模型大鼠骨强度的作用。方法:采用髓腔冲洗离心法从雌性Lewis大鼠股骨获取骨髓间充质干细胞,将传代培养后的细胞分为5组。A组不进行干预,B组加入二甲基亚砜,C、D、E组分别加入浓度为1μg·mL-1、10μg·mL-1、100μg·mL-1的柚皮苷。培养6 h后收集细胞采用RT-PCR法测定各组细胞Runx-2和Osterix的mRNA表达水平。将24只雌性SD大鼠的卵巢切除,3个月后将其随机分为4组,每组6只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别以60 mg·kg-1、300 mg·kg-1和1 500 mg·kg-1柚皮苷灌胃,Ⅳ组给予等体积的PBS灌胃,每天灌胃1次,持续2个月。药物干预结束后,测定大鼠股骨强度和胫骨骨小梁面积。结果:①Runx-2 mRNA和Osterix mRNA表达水平。B、C、D、E组大鼠骨髓间充质干细胞Runx-2 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义[(1.10±0.02),(2.05±0.31),(2.76±0.14),(1.82±0.10),F=44.021,P=0.000]。进一步两两比较,C、D、E组Runx-2 mRNA表达水平高于B组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);D组高于C组和E组(P=0.001,P=0.000);C组和E组比较,差异无统计学意义(P=0.153)。B、C、D、E组Osterix mRNA表达水平比较,差异有统计学意义[(1.02±0.10),(1.11±1.35),(3.24±0.30),(2.55±0.35),F=7.037,P=0.012]。进一步两两比较,D组和E组Osterix mRNA表达水平高于B组(P=0.031,P=0.005);C组和B组比较,差异无统计学意义(P=0.886);C组低于D组和E组(P=0.006,P=0.039);D组和E组比较,差异无统计学意义(P=0.267)。②股骨生物力学强度。4组骨质疏松模型大鼠股骨强度比较,差异有统计学意义[(773.36±9.21)N·mm-1,(805.66±16.00)N·mm-1,(766.70±38.96)N·mm-1,(707.46±15.88)N·mm-1,F=37.776,P=0.000]。进一步两两比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组股骨强度均高于Ⅳ组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);Ⅰ组和Ⅲ组比较,差异无统计学意义(P=0.509);Ⅱ组高于Ⅰ组和Ⅲ组(P=0.004,P=0.001)。③胫骨骨小梁面积。4组骨质疏松模型大鼠胫骨骨小梁面积比较,差异有统计学意义[(22.26±2.32),(25.10±2.18),(23.66±3.26),(15.63±2.00),F=14.168,P=0.000]。进一步两两比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组胫骨骨小梁面积均大于Ⅳ组(P=0.001,P=0.000,P=0.000);Ⅰ组与Ⅱ组和Ⅲ组比较,差异均无统计学意义(P=0.090,P=0.387);Ⅱ组和Ⅲ组比较,差异无统计学意义(P=0.374)。结论:柚皮苷可促进体外培养的骨髓间充质干细胞中Runx-2和Osterix的表达,增强骨质疏松模型大鼠的骨强度,增大骨小梁面积。