PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)中假阴性的探讨

被引：5

作者：

闫冬春 ^{[1
]}

董双林 ^{[1
]}

黄倢 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国海洋大学水产学院教育部水产养殖重点实验室

[2] 中国水产科学研究院黄海水产研究所

来源：

海洋与湖沼 | 2007年 / 02期

关键词：

PCR; 假阴性; 白斑综合征病毒;

D O I：

暂无

中图分类号：

S945 [甲壳类病虫害及其防治];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

采用PCR、核酸探针斑点杂交、组织切片等方法研究了PCR检测白斑综合征病毒(WSSV)中的假阴性问题。设计了一对引物用于PCR检测WSSV,PCR扩增的产物长度为235bp,检出极限为0.1pg WSSV DNA。结果表明,PCR检测15例攻毒螯虾鳃样品时出现一例阴性,而经10—106倍稀释后的样品却呈现阳性,推断PCR出现了假阴性。核酸探针斑点杂交及组织切片结果表明注射WSSV的螯虾鳃组织确已被严重感染,进一步证实了PCR假阴性。根据PCR的检出极限及模板稀释梯度,推算出该PCR能成功扩增的引物与模板浓度的比例范围约为2.4×105—2.4×1010。

引用

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