髓系触发受体-1在柯萨奇病毒B3导致的炎症反应及心肌细胞损伤中作用的实验研究

目的通过体外观测柯萨奇病毒B3(CVB3)感染后髓系触发受体-1(TREM-1)在巨噬细胞中的表达,进一步探讨病毒性心肌炎炎症损伤的作用机制。方法 CVB3感染巨噬细胞后,按感染时间进行分组,检测各组TREM-1 mRNA的转录情况(具体分为0 h、1 h、4 h、8 h和12 h组),免疫印迹法检测TREM-1及其下游分子DAP-12蛋白的表达(具体分为0 h、16 h、24 h和48 h组),用LP-17阻断TREM-1作为干预组,与单纯CVB3感染组(24 h)和不感染CVB3的对照组比较,酶联免疫吸附法检测巨噬细胞分泌蛋白肿瘤坏死因子α(TNF-α)的量,用CCK8和Annexin V-FITC观察与巨噬细胞上清共培养后的心肌细胞的活力和凋亡。结果 CVB3感染后4 h组TREM-1 mRNA表达量高于0 h组(但差异无统计学意义),8 h组和12 h组则显著高于0 h组(P均<0.01),16 h组和24 h组TREM-1蛋白表达水平显著高于0 h组(P均<0.01)。CVB3感染24 h组和48 h组TREM-1的下游信号分子DAP-12的蛋白表达也显著高于0 h组(P均<0.01)。LP-17 f预组巨噬细胞分泌的TNF-α的量明显少于CVB3感染组(24 h)(P<0.01)。ILP-17干预组心肌细胞的活力显著高于CVB3感染组(24 h)(P<0.01),细胞凋亡少于CVB3感染组(24 h)(P<0.01)。结论 CVB3通过诱导巨噬细胞中TREM-1的表达产生过度的炎症反应,进一步引发心肌细胞的间接损伤是急性病毒性心肌炎的发病机制之一。