应用PCR微量板杂交法检测植物病毒和类病毒

被引：12

作者：

王明霞

机构：

[1] 福州动植物检疫局!

来源：

植物保护 | 1996年 / 01期

关键词：

类病毒; DNA; PCR; 量板; 杂交法;

D O I：

暂无

中图分类号：

S432.41 [];

学科分类号：

摘要：

<正>近年来,核酸杂交技术已广泛用于病毒和类病毒的检测。通常采用PCR(聚合—酶链式反应)微量板杂交法。它是由Inouye和Hondo(1990)首先改正的一种新的杂交方法,是以RT-PCR为基础,类似于ELISA高灵敏度的诊断技术,可以检出极微量的病原物,如10fg病毒RNA,灵敏度为ELISA的10000倍,特异性比PCR强,很适宜进出境植物苗木、种子的检疫。其基本原理:从感病植物叶片或种子中抽提病毒或类病毒核酸,经反转录(reverse transcription)为cDNA,再经聚合酶链式反应(Polymerase chain reacdon,PCR)扩增cDNA片断,把cDNA加热变性后直接吸附于聚苯乙烯微量板孔内;将吸附于孔内的cDNA与地高辛(DIG)标记的cDNA探针杂交;杂交物再与碱性磷酸酯酶标抗DIG抗体

引用

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