乙型肝炎病毒前S1基因酵母表达载体的构建及表达

为探讨乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白的功能 ,在真核生物酵母细胞中表达HBV前S1基因。以HBVayw亚型全长质粒pCP10为模板 ,多聚酶链反应 (PCR)扩增HBV前S1基因 ,克隆到pGEM T载体中 ,双酶切后回收与酵母表达质粒pGBKT7连接。将重组载体转化酵母细胞AH10 9,提取酵母蛋白质 ,进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western免疫印迹分析。结果成功地构建了HBV前S1基因酵母表达载体 ,Western免疫印迹显示HBV前S1在酵母细胞中表达 ,表达产物在胞内存在 ,分子量 30kD左右。表明HBV前S1蛋白在酵母细胞中表达成功。