创伤弧菌溶细胞素基因在大肠杆菌中的表达及溶血活性鉴定

被引：9

作者：

李桂军 ^{[1
]}

楼永良 ^{[1
]}

严杰 ^{[2
]}

机构：

[1] 温州医学院检验学院温州医学院微生态学研究所

[2] 浙江大学医学院病原生物学教研室

来源：

中国人兽共患病学报 | 2007年 / 09期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

创伤弧菌溶细胞素; E.coli表达; 溶血活性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378.2 [肠道杆菌];

学科分类号：

摘要：

目的用大肠杆菌表达系统表达创伤弧菌溶细胞素,并对其溶血活性进行评价。为今后的免疫学活性研究和单克隆检测试剂盒的研发奠定基础。方法构建pET28a(+)-vvhA表达载体,对包涵体进行三步洗涤后,用金属亲合层析(HisTag)纯化重组蛋白,并用溶血试验验证重组蛋白活性。结果用基因工程的方法成功获得高表达、高纯度(纯度≥96%)重组蛋白VVC。利用兔红细胞溶血试验检测表明,重组蛋白具有溶血活性,其活性为0.2μg/HU。结论成功用大肠杆菌表达系统表达创伤弧菌溶细胞素并对其纯化、复性条件进行优化。

引用

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