PEG6000沉淀结合差速离心方法浓缩水中脊髓灰质炎病毒

被引:13
作者
张文清
马文煜
骆文静
姜绍谆
胡艳冰
侯悦
张进
于碧云
机构
[1] 第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室!陕西西安
[2] 第四军医大学基础部微生物学教研室!陕西西安
关键词
脊髓灰质炎病毒; 病毒分离与纯化; 聚乙二醇; 离心法;
D O I
暂无
中图分类号
R123.1 [水的卫生标准和水的卫生监测];
学科分类号
摘要
目的 建立一种简便、有效的从细胞培养物中纯化PV1病毒的方法用于水病毒消毒实验 .方法  PV 1 Henan株在 Hep- 2细胞中增殖后用聚乙二醇 (PEG) 6 0 0 0沉淀结合差速离心的方法纯化病毒 .RT- PCR和透射电镜 (TEM)鉴定提纯病毒的形态学和分子生物学特性 .结果  p H值 7.5时终浓度 70 g· L- 1的 PEG6 0 0 0沉淀病毒的感染性回收率(PFU计数 )为 79.2 % ,提纯系数 (PF)为 1 0 6 ,再经差速离心(1 6 0 0 0 g30 m in,1 0 0 0 0 0 g4.5 h)浓缩病毒的感染性回性率和提纯系数分别为 2 9.0 %和 1 6 8.RT- PCR和 TEM最终鉴定提纯物为 PV 1 Henan株 .结论  PEG 6 0 0 0结合差速离心的方法较之蔗糖密度梯度区带离心方法易于操作 ,且比单独PEG沉淀有更高的纯化系数 ,是一种简便、有效的方法 .
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