CR2-DAF和DAF-CR2靶向补体抑制物的构建、表达与鉴定

被引：2

作者：

贾雷立 ^{[1
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马巍娜 ^{[1
]}

宋宏彬 ^{[1
]}

刘雪林 ^{[1
]}

董世存 ^{[1
]}

张传福 ^{[1
]}

孙走南 ^{[1
]}

钟彦伟 ^{[2
]}

机构：

[1] 军事医学科学院疾病预防控制所

[2] 解放军第医院

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2008年 / 03期

关键词：

CR2; 促衰变因子; 补体; 抑制物;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.004610

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的:构建针对补体激活物的特异靶向补体抑制物,并对其进行体外活性鉴定。方法:将补体受体(CR2)与补体抑制物(促衰变因子,DAF)以融合表达方式(顺反结构)克隆到表达载体PBM中,然后将重组体转移到CHO细胞中进行蛋白表达,用SDS-PAGE、Western blot、流式细胞术(FCM)检测、SPR检测及补体介导的细胞溶解实验对表达的融合蛋白进行生物学活性鉴定。结果:SDS-PAGE和Western blot结果显示出现预期大小的目标片段。FCM与SPR检测结果显示,重组蛋白CR2-DAF与DAF-CR2能特异地与C3包被的CHO细胞、C3dg配基相结合。补体介导的细胞溶解实验结果显示,靶向补体抑制物比相应的非靶向补体抑制物的抑制效果明显(CR2-DAF的抑制效率高达20倍)。结论:成功构建了CR2-DAF和DAF-CR2靶向补体抑制物,为下一步进行动物体内补体抑制实验奠定了基础。

引用

页码：210 / 212

页数：3

共 3 条

[1] Effects of combined expression of human complement regulatory proteins and H-transferase on the inhibition of complement-mediated cytolysis in porcine embryonic fibroblasts [J].

Lee, J. H. ;

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Jeon, H. Y. ;

Hwang, W. S. ;

Paik, N. W. ;

Rho, H. M. .

TRANSPLANTATION PROCEEDINGS, 2006, 38 (05) :1618-1621

[2]

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[3]

The Role of Complement in B Cell Activation and Tolerance[J] . Michael C. Carroll.Advances in Immunology . 2000

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