重组酵母鸡γ干扰素的抗病毒活性测定及临床初步应用

被引:12
作者
蔡梅红 [1 ]
张素芳 [2 ]
曹瑞兵 [2 ]
郭伟玲 [3 ]
陈溥言 [2 ]
机构
[1] 江苏大学生物与环境工程学院
[2] 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院
[3] 山东潍坊华辰科技有限公司
关键词
鸡γ干扰素; 分泌表达; 临床应用;
D O I
10.13343/j.cnki.wsxb.2006.01.024
中图分类号
S852.52 [];
学科分类号
摘要
为了获得具有天然抗病毒活性的重组酵母鸡γ干扰素,以Con A(刀豆素A)诱导培养4~10h的鸡全血中提取的淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出鸡γ干扰素成熟蛋白基因。通过EcoRⅠ和XbaⅠ两个酶切位点把鸡γ干扰素成熟蛋白基因插入到酵母表达载体pPICZa-A上,得到了重组酵母鸡γ干扰素表达载体pPICZa-A-CHIFN-γ,经BstxⅠ线性化后的重组载体被转入酵母菌株X33中,通过PCR的方法来筛选重组酵母菌,在甲醇诱导表达后,SDS-PAGE结果显示有两株重组菌在诱导72h后其表达上清中有大小为16kDa的目的条带。干扰素生物活性测定经典实验(微量病变抑制实验)和临床初步应用结果皆说明重组酵母鸡γ干扰素具有较强的抗病毒的生物活性和较好的临床使用前景。
引用
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