H5亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测技术

被引：8

作者：

谢青梅 ^{[1
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曹永长 ^{[2
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张祥斌 ^{[1
]}

李少璃 ^{[1
]}

冀君 ^{[1
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马静云 ^{[1
]}

毕英佐 ^{[1
]}

机构：

[1] 华南农业大学动物科学学院

[2] 中山大学生命科学学院

来源：

中国兽医学报 | 2010年 / 30卷 / 01期

关键词：

H5亚型禽流感病毒; HA; RT-LAMP;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.01.022

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

摘要：

根据GenBank中H5N1亚型流感病毒HA基因保守区的序列,设计1组对应HA序列6个区域的4条特异性引物进行核酸扩增,建立RT-LAMP反应体系,优化LAMP反应条件,最佳等温扩增反应条件为65℃保温60min。扩增后产物加入核酸染色剂SYBRⅠ和4 mmol/L Mg2+,结果可视。扩增产物可用特异性内切酶KpnⅠ进行酶切鉴定。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法一致。RT-LAMP技术整个检测过程只需1～2 h,不需要PCR仪和成像系统,仅需要一恒温水浴锅即可完成试验。通过特异性、敏感性试验,验证了建立的RT-LAMP技术可以作为一种操作简单,灵敏性、特异性高的检测H5亚型禽流感病毒的方法。

引用

页码：41 / 46

页数：6

共 7 条

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