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应用多重PCR方法检测大肠埃希菌O157:H7的初步研究附视频
被引:7
作者:
严笠
田小军
薛燕萍
李爽
甘绍伯
机构:
[1] 北京热带医学研究所!北京!
来源:
关键词:
H7;
聚合酶链反应;
志贺样毒素;
溶血素;
D O I:
暂无
中图分类号:
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号:
100208 ;
摘要:
目的 研究一种快速、特异的检测大肠埃希菌 (以下称大肠杆菌 )O15 7:H7的复合PCR方法。方法 选用针对大肠杆菌O15 7:H7志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ (SLT -Ⅰ、SLT -Ⅱ )和溶血素 (Hly)基因的三对引物 ,在同一扩增体系中进行PCR ,检测12株不同来源的O15 7:H7大肠杆菌及其它致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌 15株。结果 除质粒缺失株 (933)外 ,其余 11株O15 7:H7大肠杆菌均在 36 1bp处有溶血素基因产物出现 ;而 12株O15 7:H7大肠杆菌扩增后的两条志贺样毒素基因产物存在差异 ,其中 6株在 2 10bp、484bp处出现两条相应产物 ,3株仅有 2 10bp一条SLT -Ⅰ基因产物 ,另 3株仅有 484bp的SLT-Ⅱ基因产物。其它致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌的扩增结果均为阴性。结论 本复合PCR方法具有较高的特异性 ,可迅速、有效地将O15 7:H7大肠杆菌与其它常见致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌相鉴别 ,通过进一步研究有望应用于临床大肠杆菌O15 7:H7感染的辅助诊断
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