樟树ISSR-PCR反应体系优化研究

被引:14
作者
邢建宏 [1 ]
陈存及 [1 ]
张国防 [1 ]
彭东辉 [1 ]
刘宝 [1 ]
陈碧华 [2 ]
机构
[1] 福建农林大学林学院
[2] 福建省林业科学研究院
关键词
樟树; ISSR; PCR反应体系优化;
D O I
10.13428/j.cnki.fjlk.2006.03.023
中图分类号
S792.23 [樟];
学科分类号
0829 ; 0907 ;
摘要
以樟树基因组DNA为材料,分析了影响樟树ISSR-PCR的主要参数,确立了适用于樟树的ISSR反应体系和扩增条件。结果表明获得清晰、重复性高的樟树ISSR-PCR扩增条件为:20μL PCR反应体积中,1×PCR Buffer(10 mmol.L-1Tris.HCl,pH8.3,50 mmo.lL-1KCl),2.0 mmo.lL-1MgCl2,200μmol.L-1dNTPs,50 ng模板DNA,200 nmo.lL-1引物,0.5 UTaq DNA聚合酶。在扩增过程中,引物的适宜退火温度比其Tm值平均高3℃。这为今后利用ISSR标记技术开展樟树种间遗传多样性分析提供参考。
引用
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