共 9 条
养殖刺参腐皮综合征两种致病菌Dot-ELISA快速检测
被引：21
作者：
谢建军
王印庚
张正
荣小军
机构：
[1] 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所
[2] 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所 山东青岛
[3] 上海水产大学生命科学与技术学院
[4] 上海
来源：
关键词：
刺参(Apostichopus japonicus);
腐皮综合征;
灿烂弧菌(Vibrio splendidus);
假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens);
Dot-ELISA;
快速检测;
D O I：
暂无
中图分类号：
S947 [其他水产病虫害及其防治];
学科分类号：
0906 ;
摘要：
以养殖刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征两种主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为抗原,分别制备兔抗血清,建立了两种病原菌的点酶ELISA(Dot-ELISA)检测方法。根据方正试验,确定检测用一抗、二抗最佳工作稀释度:灿烂弧菌抗血清稀释度320,酶标二抗稀释度3 000;假交替单胞菌抗血清稀释度160,酶标二抗稀释度2 000。阻断试验结果表明两种抗血清特异性均较高。灿烂弧菌抗血清在稀释度为40时与溶藻胶弧菌、河流弧菌、创伤弧菌等弧菌发生微弱交叉反应,提高稀释度到160时,不发生交叉反应。假交替单胞菌抗血清基本不与常见海水致病弧菌发生交叉反应。人工感染试验检测结果表明该方法能从患病海参溃烂组织、未发病海参组织和感染水体检测到相应致病菌,检测灵敏度为9.4×103个/mL。人工感染试验检测结果经直接凝集反应验证。该方法操作简便、灵敏度高,不需复杂仪器设备,适合在基层推广。
引用
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