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人脑源性神经营养因子cDNA克隆及在酵母中的表达
被引：2
作者：
刘志敏
蓝正道
谢志伟
王笑辛
戚正武
朱诚
机构：
[1] 第二军医大学长征医院神经外科
[2] 中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室
来源：
关键词：
人脑源性神经营养因子；基因表达；酿酒酵母;
D O I：
10.16781/j.0258-879x.1998.03.007
中图分类号：
Q78, [];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
目的：克隆和表达人脑源性神经营养因子（ｈＢＤＮＦ）。方法和结果：从原代培养人雪旺细胞中提取总ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法获取了编码带前导肽的和成熟的ｈＢＤＮＦ２个ｃＤＮＡ片段，经ＤＮＡ测序表明其顺序与文献报道一致。将这２个ｃＤＮＡ片段分别插入到大肠－酵母穿梭质粒ｐＶＴ１０２Ｕ／α上。用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞，经筛选后，获得分泌性表达。表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定，大小都在１５０００左右。将这２种部分纯化的ＢＤＮＦ样品经鼠胚背根神经节生物活性分析，表明具有明显的促进细胞存活和突起生长的作用。结论：ｈＢＤＮＦ能在酿酒酵母系统获得有生物活性的表达
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