牛病毒性腹泻病毒p80基因的分段表达及其抗原性分析

被引:6
作者
王丹娜
吴明福
吴立君
王君伟
机构
[1] 东北农业大学动物医学院
关键词
牛病毒性腹泻病毒; p80基因; 表达; 抗原性分析;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2006.04.001
中图分类号
S852.653 [];
学科分类号
摘要
为建立以重组p80蛋白为抗原的牛病毒性腹泻(BVD)鉴别诊断ELISA方法,采用PCR方法克隆了BVDV p80基因的A、B、C三段基因片段,分别连接到原核表达载体pGEX-6P1上,获得了重组质粒pGEX-6P1-p80A、pGEX-6P1-p80B和pGEX-6P1-p80C,将其分别转化感受态菌Rosetta和BL21,经1.0 mmol/L的IPTG诱导,分别得到大小为60、47和51 ku的目的蛋白。经Western-blotting分析,3个目的蛋白中,只有p80B(289~477 aa)基因片段所表达的融合蛋白能与BVDV阳性血清反应,表明p80蛋白的免疫优势区域集中在此部位。该融合蛋白可以作为诊断抗原用于建立ELISA诊断方法。
引用
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页码:257 / 261
页数:5
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