一步法逆转录荧光定量PCR检测食源性沙门氏菌

被引：4

作者：

周晓清

李苗云

刘杰

赵改名

柳艳霞

田玮

黄现青

高晓平

机构：

[1] 河南省肉制品加工与质量安全控制重点实验室,河南农业大学食品科学技术学院

来源：

食品科学 | 2013年 / 34卷 / 12期

关键词：

沙门氏菌; RNA; 逆转录荧光定量聚合酶链式反应;

D O I：

暂无

中图分类号：

R155.5 [食品卫生与检验];

学科分类号：

100403 ;

摘要：

建立采用一步法逆转录荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测食源性沙门氏菌的检测方法并初步应用。以沙门氏菌的invA基因为目的基因设计引物,优化PCR反应体系和反应条件,同时进行特异性、灵敏度和重复性实验;并用所建立的方法检测人工污染的猪肉样品,通过与传统计数方法的结果对比验证所建立方法的适用性。优化后的逆转录荧光定量PCR检测条件为:42℃、5min,95℃、10s,95℃、5s,67℃、34s;此步骤进行40个循环;上、下游引物的最佳终浓度均为0.16μmol/L。结果表明:该方法的特异性为100%;重复性良好;对沙门氏菌的检测下限为150CFU/mL;检测人工污染食品样品的结果100%符合传统计数结果。建立的检测方法具有快速、灵敏、简单等特点,非常适用于食源性沙门氏菌的检测。

引用

页码：182 / 188

页数：7

共 7 条

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