人次级淋巴组织趋化因子的基因克隆及原核表达

被引：1

作者：

董忠军

赵跃然

游力

高春义

魏海明

田志刚

机构：

[1] 中国科技大学免疫学研究所

[2] 山东省医学科学院基础医学研究所

[3] 中国科技大学免疫学研究所合肥山东省医学科学院基础医学研究所

[4] 济南

来源：

第二军医大学学报 | 2002年 / 10期

关键词：

基因克隆; 基因表达; 次级淋巴组织趋化因子; 大肠杆菌;

D O I：

10.16781/j.0258-879x.2002.10.020

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的 :获得人次级淋巴组织趋化因子 (SL C)基因 ,并通过大肠杆菌实现人 SL C的非融合表达。方法 :提取淋巴结组织总 RNA,RT- PCR法扩增人 SL C成熟肽基因 ,克隆到 p MD18- T载体中 ,DNA测序。用限制性内切酶切下目的基因 ,与相应酶切的表达载体 p BV 2 2 0连接、筛选、鉴定。 4 2℃热诱导表达目的蛋白 ,SDS- PAGE和 Western印迹法鉴定重组蛋白 ,分子筛初步纯化目的蛋白。结果 :表达蛋白占菌体 15 %以上 ,免疫印迹证实为特异性蛋白 ,分子筛纯化后纯度达 90 %以上。结论 :成功获得人 SL C的原核表达

引用

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