腺病毒表达载体对骨髓间充质干细胞分化能力的影响

被引:19
作者
单志新
林秋雄
李晓红
邓春玉
周志凌
黄薇
黄晓忠
余细勇
机构
[1] 广东省人民医院医学研究中心/广东省心血管病研究所
基金
广东省自然科学基金;
关键词
骨髓间充质干细胞; 腺病毒; 载体; 分化;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
目的研究腺病毒感染骨髓间充质干细胞(MSC)对MSC分化潜能的影响。方法利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒感染传至3代的人MSC,分别在感染后第2、4、8和16天收集细胞,提取总RNA,利用RT-PCR检测感染前后MSC中内胚层标志基因CYP51、中胚层标志基因SM22α、外胚层标志基因槽蛋白(nestin)、多分化潜能标志基因OCT4和可变剪切因子基因nPTB的表达。在腺病毒感染MSC7d后,利用成脂肪诱导剂继续诱导培养14d,用油红O染色观察MSC向脂肪细胞分化情况。结果RT-PCR检测显示,MSC中CYP51、SM22α、nestin、OCT4和nPTB在腺病毒感染后2、4、8和16d时仍有表达。腺病毒感染7d后的MSC仍可向脂肪细胞分化,且分化效率同正常MSC一致。结论腺病毒载体感染MSC后,不会影响MSC的分化能力,可以作为MSC诱导分化机制研究的基因表达载体。
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