甘蓝型油菜依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)基因片段克隆及hpRNAi载体构建

被引:5
作者
汪承刚
张菊红
谢妤
刘幼琪
黄邦全
机构
[1] 湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室
关键词
甘蓝型油菜; 依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK); 发夹RNA(hpRNA); 载体构建;
D O I
暂无
中图分类号
S565.4 [油菜籽(芸薹)]; Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
摘要
依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)是糖酵解途径的关键酶。本研究首先构建带有种子特异性napin启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-nap及带有组成型35S启动子和Nos终止子的植物表达载体2300-35S;然后用PCR法从甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)中油119总基因组中扩增出依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK)基因片段,再以扩增出的PFK基因片段作模板设计引物扩增出一个相应的小片段。将两个PFK基因片段反向连接,插入到植物表达载体2300-nap的napin启动子和nos终止子之间,植物表达载体2300-35S的35S启动子和nos终止子之间,分别构建成可转录表达出发夹RNA(hairpinRNA,hpRNA)结构的种子特异型和组成型油菜RNA干扰载体,为今后油菜利用RNA干扰(RNAi)提高含油量的基因工程研究奠定了基础。
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Dong, JZ ;
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Yan, W ;
Georges, F .
PLANTA, 2004, 218 (03) :483-491
[4]  
The small, versatile pPZP family of Agrobacterium binary vectors for plant transformation[J] . Peter Hajdukiewicz,Zora Svab,Pal Maliga.Plant Molecular Biology . 1994 (6)