人肾癌组织中热休克蛋白gp96-肽复合物提取、纯化及体外的免疫效应

被引：3

作者：

张杰

殷勇

田波

孟颂东

张孝斌

机构：

[1] 武汉大学人民医院泌尿外科

[2] 武汉大学生命科学院

[3] 美国西南大学医学中心肿瘤免疫所

来源：

中华实验外科杂志 | 2005年 / 06期

基金：

中国博士后科学基金;

关键词：

热休克蛋白gp96; 蛋白质纯化; 肾癌;

D O I：

暂无

中图分类号：

R737.11 [肾、肾盂肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的建立从人肾癌组织中提取、纯化热休克蛋白(HSP)gp96肽复合物的方法,并检测其体外免疫效应。方法采取三步蛋白纯化法从人肾癌患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96肽复合物,SDSPAGE、Westernblot鉴定HSPgp96肽复合物。应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HSPgp96肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数的体外免疫活性。结果应用该方法提取的蛋白质经SDSPAGE和Westernblot特异性鉴定,证实是HSPgp96肽复合物;蛋白得率为每g湿重肾癌组织可纯化HSPgp96肽复合物40～60μg。γ-干扰素ELISPOT检测,HSPgp96肽复合物组产生γ-干扰素效应T细胞频数最高(287.50±22.34),以后依次为单纯多肽组(135.25±12.80)、阳性对照组组(102.25±14.76)、阴性对照组(35.50±11.10),各组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HSPgp96肽复合物组与单纯多肽组、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯多肽组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性及高免疫效应等优点。

引用

页码：708 / 710

页数：3

共 5 条

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