多重逆转录聚合酶链反应检测常见呼吸道病毒

目的建立一种可同时快速检测引起人呼吸道感染的重要病毒病原的检测方法。方法通过对PCR反应条件的优化,建立同时检测季节性甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)、人鼻病毒(HRV)和甲型H1N1流感病毒(H1N1)的多重RT-PCR方法。结果该法可同时或分别扩增INFA 212 bpI、NFB 489 bp、HRV 380 bp和H1N1 153 bp的基因片段。检测的敏感性分别为104、104、103、104copies/mL。采用相同的反应体系和条件,分别对其他6种常见病原体(包括肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌核酸)进行扩增,均未检测出扩增产物。结论此种多重RT-PCR法适用于4种重要呼吸道病毒的快速甄别。