共 1 条
大鼠白蛋白基因片段的克隆及其mRNA半定量检测方法的建立
被引:4
作者:
王新颖
李维勤
李宁
黎介寿
机构:
[1] 南京军区南京总医院
[2] 南京军区南京总医院 南京
[3] 南京
来源:
关键词:
白蛋白;
基因表达,克隆;
逆转录聚合酶链反应;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号:
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要:
白蛋白mRNA已被证实是反映白蛋白合成变化的重要指标。实验探讨大鼠白蛋白基因片段的克隆及白蛋白mRNA半定量检测方法的建立。使用一步法逆转录聚合酶链反应扩增的白蛋白cDNA片断 ,连接入pGEM T载体中 ,经ABIPRISM 3 77型全自动核苷酸分析仪检测。同时用不同浓度的内毒素处理肝细胞后检测其白蛋白mRNA的表达。扩增的基因片段经DNA序列分析 ,证实其由40 1个碱基组成。同时发现 ,内毒素可以抑制白蛋白mRNA的表达 ,且抑制作用与内毒素的剂量相关。提示 ,大鼠白蛋白基因片段的成功克隆及稳定的白蛋白mRNA半定量检测方法的建立
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