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恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定
被引:3
作者:
李林海
李明
吴英松
王萍
田泽维
机构:
[1] 广州军区广州总医院检验科,第一军医大学热带医学研究所,第一军医大学热带医学研究所,第一军医大学热带医学研究所,第一军医大学热带医学研究所广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州
来源:
关键词:
疟原虫,恶性;
谷氨酸脱氢酶;
免疫活性;
D O I:
暂无
中图分类号:
R446.6 [免疫学检验];
学科分类号:
100208 ;
摘要:
目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆入pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western blotting检测重组抗原的免疫活性。结果获到了重组表达的抗原蛋白,表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1∶16。结论恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。
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