衰老过程中线粒体顺乌头酸酶活性变化对能量合成的影响

被引：10

作者：

叶薇 ^{[1
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陈赛慧 ^{[1
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郝东杰 ^{[1
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郑屹 ^{[1
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曹建明 ^{[2
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吕建新 ^{[1
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机构：

[1] 温州医学院检验医学与生命科学学院

[2] 温州医学院环境与公共卫生学院

来源：

中国病理生理杂志 | 2013年 / 29卷 / 07期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

衰老; 线粒体; 顺乌头酸酶; 能量合成; 氧化性应激;

D O I：

暂无

中图分类号：

R363 [病理生理学];

学科分类号：

100103 [病原生物学];

摘要：

目的:利用自然衰老雄性SD大鼠和D-半乳糖(D-Gal)诱导的细胞衰老模型,研究在衰老细胞中线粒体顺乌头酸酶(mitochondrial aconitase,ACO2)活性的变化及其对能量合成的影响。方法:利用55 mmol/L D-Gal诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5衰老,并采用蔗糖连续密度梯度离心法分离大鼠脑组织和MRC-5细胞的线粒体;ACO2活性根据反应产物NADPH在340 nm的吸光度变化率进行检测,其表达水平分析分别用荧光定量PCR和Western blotting完成;利用试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量以反映细胞氧化还原状态;组织铁含量的检测则通过菲咯嗪法进行;线粒体膜电位及腺苷酸含量分别应用JC-1荧光探针法和高效液相色谱法检测,并计算能荷。结果:随着大鼠月龄增加,ACO2活性逐渐下降,表达水平无明显差异,组织铁水平逐渐升高;体外氧化应激实验显示ACO2活性随H2O2处理浓度和时间增加而下降;细胞衰老模型中,SOD活性降低,MDA含量升高,ACO2活性下降而表达水平未变;自然衰老大鼠和细胞衰老模型中,线粒体膜电位、ATP合成与能荷呈明显下降趋势。结论:衰老过程中,随着氧化压力增加,氧化应激敏感的ACO2活性下降,影响三羧酸循环效率,同时伴线粒体膜电位下降,进而使得能量合成降低。

引用

页码：1275 / 1282

页数：8

共 5 条

[1]

In the aging housefly aconitase is the only citric acid cycle enzyme to decline significantly [J].